+7 (496) 618-57-75, 616-51-81
+7 (916) 654-54-84
г.Коломна ул. Уманская, д.19А, офис 27
Пн-Пт. 9 00 до 21 00 Сб. 9 00 до 19 00

Критерий нормальной десны


Состояние десны оценивается по следующим критериям

Состояние десны оценивается по следующим критериям:

– Цвет, физиологическая пигментация. Здоровая десна бледно-розового цвета. В зависимости от физиологических и патологических процессов в десне ее цвет может колебаться от розового до темно-красного с цианотичным оттенком. Изменение цвета десны может происходить и в связи с накоплением естественного природного пигмента, солей тяжелых металлов, прокрашивания пищевыми красителями.

– Размер. Изменение размера десны при сохранении ее позиции может происходить вследствие отека, фиброзных изменений, атрофических процессов.

– Контур, форма. Валикообразные утолщения десны, сглаженность контуров, изменение формы межзубных сосочков, щелевидные дефекты, рецессия десны являются признаками различных патологических процессов в периодонте.

– Консистенция. В норме десна плотная при пальпации. При воспалении возникает пастозность десны, проявляющаяся медленным восстановлением первоначальной формы после надавливания тупым концом инструмента.

– Текстура поверхности. Высушенная десна по виду напоминает лимонную корочку. При отечности, фиброзных изменениях десна при осмотре гладкая. Также при пальпации определяется болезненность десны, наличие отделяемого из периодонтального кармана.

– Позиция. Увеличение либо уменьшение позиции десны оценивается по отношению к эмалево-цементной границе соответствующего зуба, или в сравнении с десной рядомстоящих зубов. Изменение позиции десны возможно при воспалительных, атрофических и дистрофических процессах в периодонте.

Кроме изменений десны, выявляемых при осмотре, наиболее ранними признаками воспаления десны является увеличение десневой жидкости и кровоточивость. Колическтво десневой жидкости определяют с помощью полосок фильтровальной бумаги шириной 4 м и длиной 15 мм, которые вводятся в десневую бороздку на 3 мин. Количество адсорбированной десневой жидкости определяется путем взвешивания на торсионных весах или путем определения площади пропитывания после предварительного окрашивания зоны пропитывания 0,2 %-ным спиртовым раствором нингидрина. Однако эта методика требует наличия специальных реактивов и длительного времени для прокрашивания. Возможно использование в качестве измерительной полоски универсальную индикаторную бумагу. Десневая жидкость, имея рН близкую к нейтральной, «окрашивает» бумагу в желтый цвет, а гидрофильность фильтровальной и индикаторной бумаги одинакова. Для количественной оценки десневой жидкости разработан шаблон, позволяющий рассчитывать полученное количество жидкости в мг. При легкой степени воспаления количество десневой жидкости увеличивается до 0,52 мг, при средней и тяжелой — до 1,53 мг.

Симптом кровоточивости десны оценивается при легком (с усилием 0,25 Н) зондировании десневого желобка, на протяжении 30 секунд после зондирования.

Важным параметром оценки состояния периодонта является наличие или отсутствие зубодесневого прикрепления, потеря которого ведет к образованию зубодесневого (периодонтального) кармана. Потерю зубодесневого прикрепления можно оценить как расстояние между эмалево-цементной границей и дном зубодесневого кармана. А глубина кармана определяется как расстояние между краем десны и дном кармана.

Зубодесневым карманом принято называть патологически измененную десневую бороздку. Различают следующие разновидности карман

А. Ложные (десневые).

В. Истинные (периодонтальные, зубодесневые).

– надкостные;

– внутрикостные.

Глубина кармана определяется периодонтальным зондом (пуговчатым с цветной маркировкой), вводимым в периодонтальный карман или (при здоровой десне) в десневую борозду и оценивается относительно края десны. Глубину кармана в области каждого зуба определяют, как минимум, в четырех местах (с мезиально-щечной, щечной, дистально-щечной и оральной поверхностей). Глубина зондирования зависит от величины давления при введении зонда (усилие примерно 0,25 Н), степени воспаления периодонта, угла введения зонда относительно поверхности зуба, подвижности зуба, наличия поддесневых зубных отложений. В воспаленной десне или при значительной подвижности зуба периодонтальный зонд беспрепятственно проникает сквозь разрыхленные ткани дна зубодесневого кармана. Поэтому значение глубины зондирования более важно, чем значение гистологической глубины кармана.

Измерения глубины кармана манульными зондами не лишены неточности. При мануальном зондировании очень важным является сила нажатия, которая, как уже указывалась выше, не должна превышать 0,25 ньютон. Стоматологи должны научиться оказывать именно это давление. Если вставить зонд под ногтевую пластинку можно определить наступление болевых ощущений при зондировании. Исследования показали, что это состояние наступает при нажатии в 0,25 Н. На стоматологическом рынке имеется ряд зондов, позволяющих проводить контроль нажатия. Либо это пружинные системы, либо пластиковые зонды, сгибающиеся при давлении превышающем необходимое. Измерения карманов в различных исследованиях можно сопоставлять лишь при наличии постоянного давления зондирования.

Существуют также электронные измерительные системы с автоматическим постоянным давлением. Они используются в научных исследованиях, а также в специализированных периодонтологических кабинетах. Примеры таких систем — Interprobe (Bausch & Lomb, США), Florida-Probe (Florida-Probe Corporation, США), Periprobe (Ivoclar, Германия).

Ложный карман (десневой), обусловлен увеличением размеров края десны при воспалении в результате отека или гиперплазии с сохранением наличия и уровня прикрепления эпителия к зубу.

 

Десна

Десна: Десна - это мягкое тканевое покрытие, которое окружает зубы, состоящее из фиброзной ткани, которая является продолжением периодональной связки и слизистой оболочки, покрывающей зубы.

Десна имеет штриховку, которая является ее типичным внешним видом и известна как пунктирная десна, как показано на рисунке выше.

Десна - это разновидность жевательной слизистой оболочки.

Десна - это мягкая ткань вокруг зубов, которая продолжается со слизистой оболочкой полости рта, это соединение называется слизисто-десневым соединением.

Он отличается линией на изображении, которая разграничивает его из-за темного цвета слизистой оболочки (из-за высокой сосудистой сети) и светлого цвета десны (из-за наличия большего количества волокон).

Десневая борозда: она простирается от десневого края апикально до цементно-эмалевого соединения, которое действует как герметик против зуба и действует как барьер против поддесневого налета, бактерий и предотвращает потерю жидкости из подлежащих тканей.

Десна на 75% пара кератинизирована, на 15% кератинизирована и на 10% не кератинизирована.

Типы:

Десна делится на:

  • Прикрепленная десна: Густая розовая ткань, которая охватывает кость и плотно прикреплена к подлежащей кости и слизистой оболочке.
  • Free Gingiva: Мягкая тонкая подвижная ткань, которая образует внутреннюю поверхность губ и щек.

На основе эпителия:

Эпителий ротовой полости: это многослойный плоский ороговевший эпителий, выстилающий вестибулярную и оральную поверхности десны. Он простирается от слизисто-десневого соединения до десневого эпителия, за исключением небного эпителия, где он сливается с небным эпителием.

Сулькулярный эпителий: Это эпителий, который покрывает десну, находящуюся в глубине борозды.

Соединительный эпителий: Часть ткани десны, которая прикрепляется к соединительной ткани десны с одной стороны и поверхности зуба с другой. Его коронковый конец выстилает конец десневой борозды.

Гистология: Десна покрыта ороговевшим многослойным плоским эпителием, самым внешним слоем десны. Этот эпителиальный слой показывает выступы в подлежащей соединительной ткани, которые известны как «Rete Pegs».

Наружные слои эпителия ороговевшие и расслоенные, поэтому размер клеток увеличивается по мере того, как мы проникаем в десну.

Эпителий четырехслойный:

SC: Stratum Corneum - Клетки уплощенные, самый внешний слой.

SG: Stratum Granulosum - Клетки содержат гранулы и имеют относительно больший размер

SS: Stratum Spinosum - Клетки имеют шиповатый вид.

SB: Stratum Basale- Клетки округлой формы и являются пролиферативными клетками, которые дают начало новым клеткам.

Под эпителием находится соединительная ткань, которая содержит волокна, кровеносные сосуды и т. Д.

Клетки: В десне присутствуют различные типы клеток, кроме нормальных эпителиальных клеток:

Меланоциты: это клетки, которые придают темноватый цвет десне у некоторых людей с темной кожей.

Клетка Лангергана: это модифицированные макрофаги, которые помогают вырабатывать антигены.

Ячейка Меркеля: они присутствуют в глубоких слоях и действуют как тактильные проприоцептивные ячейки.

Волокна: в основном волокна

Коллагеновые волокна:

  • Преобладают волокна коллагена VII типа, которые находятся в тесном контакте с базальной пластинкой.
  • Коллагеновые волокна типа IV присутствуют в базальной выстилке эпителиальных стенок и кровеносных сосудов.

Волокна эластина: редко встречаются в собственной пластинке и часто встречаются на слизистой оболочке, эластичные волокна состоят из

  • Эластин: обеспечивает эластичность
  • Фибриллин:

Волокна окситалина: они напоминают незрелые эластичные волокна.

Заболевания десен:

Заболевания десен в основном представляют собой воспаление десен, известное как Гингивит , который бывает 2 типов

  • ОСТРЫЙ: Это может быть из-за острых инфекций или из-за плохой гигиены полости рта и накопления зубного налета и камня.
  • ХРОНИЧЕСКИЙ: Это в основном вызвано гормональным дисбалансом, плохой гигиеной полости рта, дефицитом витаминов.

Статья Варуна Пандулы

Я Варун, стоматолог из Хайдарабада, Индия, стараюсь помочь всем понять стоматологические проблемы и методы лечения и упростить стоматологическое образование для студентов-стоматологов и стоматологического братства.Если у вас есть какие-либо сомнения, не стесняйтесь связаться со мной или прокомментировать сообщение, спасибо за посещение.

.

Гингивит: причины, симптомы и лечение

Гингивит означает воспаление десен или десен. Обычно это происходит из-за того, что на зубах скапливается налет или бактерии.

Гингивит - это недеструктивный тип заболевания пародонта, но при отсутствии лечения гингивит может прогрессировать до пародонтита. Это более серьезно и в конечном итоге может привести к потере зубов.

Поделиться на Pinterest Гингивит - распространенный тип пародонтоза.

Мы включаем продукты, которые мы считаем полезными для наших читателей.Если вы покупаете по ссылкам на этой странице, мы можем заработать небольшую комиссию. Вот наш процесс.

Признаки гингивита включают красные и опухшие десны, которые легко кровоточат, когда человек чистит зубы.

Гингивит часто проходит с помощью хорошей гигиены полости рта, такой как более длительная и частая чистка зубов щеткой и зубной нитью. Кроме того, может помочь антисептическое средство для полоскания рта.

В легких случаях гингивита пациенты могут даже не знать, что они болеют, потому что симптомы легкие. Однако к этому состоянию следует относиться серьезно и немедленно устранять его.

Есть две основные категории заболеваний десен:

Заболевание десен, вызванное зубным налетом: Это может быть вызвано зубным налетом, системными факторами, лекарствами или недоеданием.

Поражения десен без образования зубного налета: Это может быть вызвано конкретной бактерией, вирусом или грибком. Это также может быть вызвано генетическими факторами, системными состояниями (включая аллергические реакции и определенные заболевания), ранами или реакциями на инородные тела, такие как зубные протезы.Иногда нет конкретной причины.

Наиболее частой причиной гингивита является скопление бактериального налета между зубами и вокруг них. Зубной налет вызывает иммунный ответ, который, в свою очередь, может в конечном итоге привести к разрушению десен или тканей десен. В конечном итоге это также может привести к дальнейшим осложнениям, включая потерю зубов.

Зубной налет - это биопленка, которая естественным образом накапливается на зубах. Обычно он образуется колонизирующими бактериями, которые пытаются прижиться к гладкой поверхности зуба.

Эти бактерии могут помочь защитить полость рта от колонизации вредных микроорганизмов, но зубной налет также может вызвать кариес и проблемы с пародонтом, такие как гингивит и хронический пародонтит, инфекция десен.

Когда зубной налет не удаляется должным образом, он может затвердеть в зубной камень или зубной камень у основания зубов, около десен. Имеет желтый цвет. Камень можно удалить только профессионально.

Зубной налет и зубной камень в конечном итоге раздражают десны, вызывая воспаление десен у основания зубов.Это означает, что десны могут легко кровоточить.

Другие причины и факторы риска

Изменения гормонов: Это может произойти во время полового созревания, менопаузы, менструального цикла и беременности. Десна может стать более чувствительной, что повысит риск воспаления.

Некоторые болезни: Рак, диабет и ВИЧ связаны с повышенным риском гингивита.

Лекарства: Некоторые лекарства могут повлиять на здоровье полости рта, особенно если отток слюны снижен.Дилантин, противосудорожное средство, и некоторые лекарства от стенокардии могут вызывать аномальный рост ткани десен.

Курение: У постоянных курильщиков чаще развивается гингивит, чем у некурящих.

Возраст: Риск гингивита увеличивается с возрастом.

Плохое питание: Недостаток витамина C, например, связан с заболеванием десен.

Семейный анамнез: Те, чьи родители болели гингивитом, также имеют более высокий риск его развития.Считается, что это связано с типом бактерий, которые мы приобретаем в раннем возрасте.

В легких случаях гингивита может не быть дискомфорта или заметных симптомов.

Признаки и симптомы гингивита могут включать:

  • ярко-красные или фиолетовые десны
  • нежные десны, которые могут быть болезненными на ощупь
  • кровотечение из десен при чистке щеткой или зубной нитью
  • неприятный запах изо рта или неприятный запах изо рта
  • воспаление, или опухшие десны
  • опускающиеся десны
  • мягкие десны

Стоматолог или гигиенист проверит наличие таких симптомов, как налет и зубной камень в полости рта.

Также может быть рекомендовано обследование на наличие признаков пародонтита. Это можно сделать с помощью рентгена или зондирования пародонта с помощью инструмента, который измеряет глубину кармана вокруг зуба.

Если диагноз поставлен на ранней стадии и если лечение будет своевременным и правильным, гингивит можно успешно вылечить.

Лечение включает в себя помощь профессионального стоматолога и последующие процедуры, проводимые пациентом дома.

Профессиональная стоматологическая помощь

Зубной налет и зубной камень удалены.Это называется масштабированием. Это может быть неудобно, особенно если образование зубного камня обширное или десны очень чувствительны.

Стоматолог объяснит важность гигиены полости рта и объяснит, как правильно чистить зубы щеткой и нитью.

Могут быть рекомендованы последующие визиты с более частыми чистками, если необходимо.

Исправление поврежденных зубов также способствует гигиене полости рта.

Некоторые стоматологические проблемы, такие как кривые зубы, плохо подогнанные коронки или мосты, могут затруднить правильное удаление зубного налета и зубного камня.Они также могут раздражать десны.

Уход на дому

Людям рекомендуется:

  • чистить зубы не реже двух раз в день.
  • используйте электрическую зубную щетку
  • чистите зубы зубной нитью не реже одного раза в день
  • регулярно полощите рот антисептическим средством для полоскания рта

Стоматолог может порекомендовать подходящую щетку и жидкость для полоскания рта.

Лечение гингивита и следование инструкциям стоматолога обычно может предотвратить осложнения.

Однако без лечения заболевание десен может распространяться и поражать ткани, зубы и кости.

Осложнения включают:

  • абсцесс или инфекцию десны или кости челюсти
  • пародонтит, более серьезное заболевание, которое может привести к потере кости и зубов
  • рецидивирующий гингивит.
  • траншея рта, где бактериальная инфекция приводит к изъязвлению десен

Несколько исследований связали заболевания десен, такие как пародонтит, с сердечно-сосудистыми заболеваниями, включая инфаркт или инсульт.В других отчетах была обнаружена связь с риском заболеваний легких.

Если вы хотите купить какое-либо из средств лечения, перечисленных в этой статье, то в Интернете есть отличный выбор с тысячами отзывов клиентов.

Магазин электрических зубных щеток

Магазин зубной нити

Магазин антисептических жидкостей для полоскания рта

.Обзор

и стратегии лечения рецессии

Одной из наиболее распространенных эстетических проблем, связанных с тканями пародонта, является рецессия десны. Рецессия десны - это обнажение поверхности корней из-за апикальной миграции краев десневой ткани; край десны смещается апикально к цементно-эмалевому соединению. Хотя это редко приводит к потере зубов, рецессия краевой ткани связана с термической и тактильной чувствительностью, эстетическими жалобами и тенденцией к кариесу корня.В этой статье рассматриваются этиология, последствия и доступные хирургические процедуры для покрытия открытых поверхностей корня, включая три отчета о случаях.

1. Введение

Рецессия десны - проблема, в той или иной степени затрагивающая почти всех людей среднего и старшего возраста. Рецессия десны - это апикальная миграция десневого края к цементно-эмалевому соединению (CEJ). Расстояние между CEJ и краем десны показывает уровень рецессии. Рецессия десны может быть вызвана заболеванием пародонта, скоплением, воспалением, неправильной чисткой зубов зубной нитью, агрессивной чисткой зубов, неправильным окклюзионным соотношением и доминирующими корнями.Они могут проявляться как локализованная или генерализованная рецессия десны. Рецессия может происходить с потерей прикрепленной ткани или без нее. Рецессия десны может вызвать повышенную чувствительность из-за обнаженного дентина, это можно оценить по внешнему виду длинного клинического зуба и по разной пропорции зубов по сравнению с соседними зубами.

2. Распространенность

Согласно Национальному исследованию США, 88% пожилых людей (в возрасте 65 лет и старше) и 50% взрослых (от 18 до 64 лет) имеют рецессию в одном или нескольких регионах; с возрастом наблюдается прогрессирующее увеличение частоты и степени рецессии [1].

В самой молодой возрастной когорте (от 30 до 39 лет) распространенность рецессии составила 37,8%, а средний размер зубов - 8,6%. Напротив, самая старая когорта в возрасте от 80 до 90 лет имела распространенность 90,4% (более чем в два раза выше) и в среднем 56,3% зубов (более чем в шесть раз больше) [2].

Рецессия десны связана с наличием наддесневого и поддесневого камня и показала, что язычные поверхности нижних передних зубов наиболее часто поражались в возрастной группе 20–34 лет у взрослого населения Танзании [3].

3. Этиология
3.1. Камень

Связь между рецессией десны с наддесневым и поддесневым камнем может быть отмечена из-за недостаточного доступа к профилактической стоматологической помощи [3].

3.2. Чистка зубов

Khocht et al. показали, что использование жесткой зубной щетки связано с рецессией [4].

3.3. Прикрепление высокого остеохондроза

Это может препятствовать удалению зубного налета, вызывая натяжение краевой части десны [5].

3.4. Положение зуба

Зуб, который прорезывается вблизи слизисто-десневой линии, может показывать локализованную рецессию десны, так как ороговевшей ткани может быть очень мало или совсем нет [6].

3.5. Движение зуба под действием ортодонтических сил

Движение зуба, такое как чрезмерный наклон резцов и расширение дуги, связано с повышенным риском рецессии десны [7].

3.6. Неправильно спроектированные частичные протезы

Частичные протезы, которые были обслужены или спроектированы, которые вызывают травму десны и способствуют удержанию зубного налета, имеют тенденцию вызывать рецессию десны [8].

3.7. Курение

У курильщиков рецессия десен больше, чем у некурящих.

Места рецессии были обнаружены на щечной поверхности моляров верхней челюсти, премоляров и центральных резцов нижней челюсти [9].

3.8. Реставрации

Поддесневые края реставрации увеличивают накопление зубного налета, воспаление десен и потерю альвеолярной кости [10].

3.9. Химические вещества

Местное применение кокаина вызывает язвы и эрозии десен [11].

4. Последствия
4.1. Эстетика

Внешний вид зуба становится некрасивым [12].

4.2. Кровотечение десен и удержание зубного налета

Рецессия может быть клинически местом, которое предлагает удержание зубного налета.

4.3. Гиперчувствительность

Рецессия обнажает цервикальный дентин. Гиперчувствительность обычно бывает резкой и непродолжительной, часто связанной с холодовым раздражителем. Принятый механизм гиперчувствительности - гидродинамическая теория боли, согласно которой движение зубной жидкости в дентинных канальцах запускает чувствительные нервные волокна во внутреннем дентине и дентинопульпальном соединении [13].

4.4. Кариес

Может возникнуть риск развития корневого кариеса, поскольку поверхности корней подвергаются воздействию окружающей среды полости рта и помогают удерживать зубной налет. Пациенты, проходящие лечение пародонта, в среднем 64,7 открытых поверхности корней на пациента; среднее количество обнаруженных кариесных поражений составило 4,3 в исследовании распространенности [14].

5. Лечение
5.1. Реставрации, коронки и виниры

Коронки могут быть установлены для расширения клинической коронки, что может замаскировать открытую поверхность корня

5.2. Изготовление десневой маски

Пациенты с рецессией нескольких зубов могут иметь неэстетичный вид из-за черных треугольников. В этих случаях, когда хирургическая процедура не подходит, можно использовать силиконовый гибкий десневой винир или маску.

5.3. Обработка корней

Нанесение тетрациклина гидрохлорида или лимонной кислоты на поверхность корня перед установкой трансплантата мягких тканей.

5.4. Френэктомия

Если рецессия вызвана растяжением уздечки, рекомендуется френэктомия.Если соответствующие средства гигиены не позволяют пациенту сохранить область без зубного налета, то рекомендуется френэктомия, чтобы облегчить доступ к участку [15].

5.5. Хирургические методы покрытия корней

(i) Свободный эпителиализированный десневой трансплантат [16]. (ii) Субэпителиальный трансплантат соединительной ткани [17]. (iii) Полулунный лоскут [18]. (iv) Коронально продвинутый лоскут [19]. (v) Управляемая регенерация тканей [GTR] [20].

6. История болезни 1

Пациентка 43 лет обратилась с жалобами на гиперчувствительность, несмотря на то, что она использовала пасту против гиперчувствительности в течение 2 месяцев, а также была обеспокоена эстетикой.При первом осмотре у пациента была рецессия десны на левом клыке верхней челюсти и первом премоляре (рис. 1). Рецессия составила 2 мм на клыке и 3 мм на первом премоляре соответственно. Клиническая потеря прикрепления составила 4 мм от CEJ для клыка и 5 мм для первого премоляра, соответственно. Была проведена пероральная профилактика и даны инструкции по гигиене полости рта для достижения удовлетворительного контроля зубного налета до операции на пародонте. После повторной оценки были выполнены полулунный разрез и внутрирезервикулярные разрезы с использованием техники 22 Тарнова (рис. 2).Корни были выровнены с помощью ручных кюреток для удаления пятен камня и получения гладких поверхностей, а затем обработаны тетрациклином в течение 3 минут (с использованием техники полировки) (рис. 3). Затем поверхности корней промывали физиологическим раствором. Лоскут располагали как можно ближе к коронке. Послеоперационное заживление через 2 месяца показало увеличение на 2 мм и покрытие корня (рис. 5).






7.Случай 2

Пациентка 31 года жаловалась на черный треугольник в области верхних передних зубов с 6 месяцев и беспокоилась по поводу эстетики и свистящего звука во время разговора (рис. 6).


Межзубный сосочек между правым центральным резцом верхней челюсти и боковым резцом был тупым (рис. 6). Была проведена пероральная профилактика и даны инструкции по гигиене полости рта, чтобы добиться удовлетворительного контроля зубного налета до операции. Внутрисосудистый разрез делается на поверхностях зубов, обращенных к межзубной области, подлежащей реконструкции (рис. 7), следовательно, разрез делается поперек лицевой стороны межзубной области, и поднимается лоскут типа конверта с разделенной толщиной; одновременно был сделан полулунный разрез апикально по отношению к слизисто-десневому соединению, и лоскут коронально смещен с использованием техники Лангерса.Трансплантат соединительной ткани берется с неба (Рисунок 8), помещается под лоскут в межзубной области (Рисунок 9) и зашивается обратно (Рисунок 10). На Рисунке 11 послеоперационное заживление через 6 месяцев показало превосходное закрытие черного треугольника между левым верхним центральным и боковыми резцами.






8. Случай 3

Пациентка 25 лет обратилась с жалобами на гиперчувствительность в области нижних передних зубов с 2 месяцев и беспокоилась о эстетике.При первом осмотре у пациента была обнаружена рецессия десны на правом центральном резце нижней челюсти (рис. 12). Клиническая потеря прикрепления составила 5 мм от CEJ. Была проведена пероральная профилактика и даны инструкции по гигиене полости рта для достижения удовлетворительного контроля зубного налета до операции на пародонте. Поверхность корня была аккуратно зачищена и выровнена; Инструментарий был сделан с использованием ручных и механических скейлеров и кюрет. Форма корня не изменилась. Затем поверхность корня обрабатывали тетрациклином 500 мг, пытаясь отполировать маленькими хлопковыми подушечками.Донорскую ткань удалили с неба и обрезали до толщины от 2 до 3 мм (рис. 15). Через несколько минут после удаления донорская ткань была помещена на место реципиента. Для фиксации трансплантата использовали вертикальные стабилизирующие швы (шелк 4–0) (рис. 16). Послеоперационное заживление через 6 месяцев показывает отличное заживление участка и полное покрытие рецессии (рис. 17).







9.Обсуждение

Основная цель пародонтальной терапии - улучшить здоровье пародонта и тем самым сохранить функциональные зубные ряды пациента на протяжении всей его жизни. Однако эстетика символизирует неотъемлемую часть современной оральной терапии, и было предложено множество процедур для сохранения или улучшения эстетики пациента. Это лечение в основном было оправдано желанием пациента улучшить эстетический вид обнаженного корня.

Этиология и сопутствующие факторы являются главными при выборе подходящих лечебных процедур для пациентов с локализованной рецессией десны.В представленных случаях этиология рецессии десны заключалась в недостаточной вестибулярной глубине и недостаточной ширине ороговевшей десны. Если предполагается, что причиной рецессии является неправильное положение зубов, то необходимо подумать об ортодонтическом лечении с или без пародонтальной терапии. В связи с наличием множества проблем слизисто-десневого отдела десны было решено использовать свободный десневой трансплантат для покрытия корня и формирования функциональной прикрепленной десны. Полоса ороговевшей ткани была признана адекватной во всех случаях.Цветовое соответствие и контур ткани были удовлетворительными для пациентов во всех вышеупомянутых случаях. В некоторых случаях совпадение цвета и контура ткани было достаточно хорошим, чтобы было сложно определить положение исходного дефекта.

Результаты текущих случаев подтверждают, что эстетика является основным показанием для покрытия корней. Недавнее исследование показало, что эстетическая проблема была главным показателем для процедуры закрытия корня [21]. Показания кроме эстетических, чувствительность корня были низкими и были сгруппированы в другую категорию, составляя 1.84% показаний.

10. Заключение

Рецессия десны - одна из основных эстетических жалоб пациентов. Это также повышает чувствительность пациентов и повышает риск корневого кариеса. Мукогингивальная хирургия пытается восстановить пародонт до здорового состояния. Пластическая хирургия пародонта стремится вернуть пародонту здоровое, эффективное и эстетичное состояние. Для покрытия обнаженных корней в настоящее время существует широкий спектр процедур мукогингивальной пластики.Эти процедуры вполне предсказуемы и дают удовлетворительное решение проблем, связанных с рецессией десен. Выбор соответствующей процедуры и хирургической техники порекомендует успешные и чрезвычайно предсказуемые результаты в лечении рецессии десны.

Ключевые результаты
Настоящая статья предполагает, что выбор подходящей процедуры и специфической и тщательной хирургической техники обеспечит успешные и чрезвычайно предсказуемые результаты в лечении рецессии десны.

.

Текущее состояние, проблемы и перспективы на будущее

Стволовые клетки периодонтальной связки (PDLSC), которые находятся в периваскулярном пространстве пародонта, обладают характеристиками мезенхимальных стволовых клеток и являются многообещающим инструментом для регенерации пародонта. В последнее время большой прогресс был достигнут в трансплантации PDLSC. Исследователи пытаются максимизировать потенциал пролиферации и дифференцировки PDLSC, изменяя условия культивирования и применяя факторы роста. Тем не менее, проблемы остаются.Во-первых, несопоставимость различных исследований должна быть сведена к минимуму путем разработки стандартных руководств по культуре и идентификации PDLSC. В частности, следует обратить внимание на биологическую безопасность трансплантации PDLSC. В настоящем обзоре обновлены последние результаты, касающиеся PDLSC, и обсуждаются стандартные критерии для культивирования и идентификации PDLSC. Наконец, обзор требует тщательного рассмотрения безопасности трансплантации PDLSC.

1. Введение

Пародонтит - это инфекционно-воспалительное заболевание полости рта, которое приводит к разрушению тканей пародонта и является основной причиной потери зубов [1].Стоматологам удалось контролировать воспаление пародонта с помощью традиционных методов лечения, но не удалось восстановить поврежденный пародонт. Целью регенеративного лечения пародонта является восстановление физиологической функции зубов путем восстановления поддерживающих тканей пародонта, включая альвеолярную кость, десну, периодонтальные связки (PDL) и цемент. При регенерации тканей поврежденные ткани пародонта можно восстановить с помощью стволовых клеток, факторов роста или каркаса внеклеточного матрикса [2].На сегодняшний день исследованы несколько типов стволовых клеток на предмет регенерации пародонта, которые включают мезенхимальные стволовые клетки (МСК), эмбриональные стволовые клетки (ЭСК) и индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (ИПСК). МСК получают все большее признание для использования при регенерации пародонта, потому что их применение не связано с этическими проблемами, как ESC [2]. МСК были первоначально обнаружены в костном мозге, и было обнаружено, что мезенхимальные стволовые клетки костного мозга (BMMSC) способствуют регенерации пародонта при трансплантации в костные дефекты пародонта [3].Принимая во внимание неудобства получения BMMSC, такие как боль и травмы от инвазивной аспирации костного мозга и низкое количество собранных клеток [4], последующие попытки получить МСК были из тканей зубного происхождения, таких как периодонтальная связка [5], десна. [6], зубные фолликулы [7], пульпа зуба [8], апикальный сосочек [9] и слущенные временные зубы человека [2, 10]. В 2004 году Seo et al. [5] успешно изолировали мультипотентные стволовые клетки периодонтальной связки (PDLSC) из пораженных третьих моляров человека, и эти клетки могли дифференцироваться в периодонтальные связки, альвеолярную кость, цемент, периферические нервы и кровеносные сосуды [11–13].В настоящее время улучшение регенеративной способности PDLSC представляет интерес для исследователей, и настоящий обзор раскрывает последние открытия, касающиеся PDLSC, и подробно описывает трудности и опасения, связанные с PDLSC с точки зрения культуры клеток, идентификации и биологической безопасности.

2. Основные свойства стволовых клеток пародонтальной связки

Сообщается, что ткани пародонта возникают из мигрировавших клеток нервного гребня во время развития зубов [14]. Однако PDLSCs, полученные из зрелых пародонтальных связок, обладают свойствами стволовых клеток, подобными MSCs, а не клеткам нервного гребня [15].Более конкретно, PDLSC экспрессируют поверхностные маркеры MSC (CD105 [16-20], CD90 [16-18, 20, 21] и CD73 [19, 22]), но не имеют экспрессии CD45, CD34 и CD14 или CD11b, CD79a, или CD19 и HLA класса II [20]. Более того, PDLSC, расположенные в периваскулярной стенке периодонтальных связок, имеют сходство с перицитами по морфологии, потенциалу дифференцировки, клеточному фенотипу (экспрессия перицит-ассоциированных маркеров CD146, нейрального / глиального антигена-2 и CD140B) и способности образовывать капиллярно-подобные структуры in vitro [23].Недавние исследования показывают, что МСК, полученные из различных типов тканей (головного мозга, легких, печени, почек, мышц, кожи и костного мозга), также обладают характеристиками перицитов [24, 25].

Кроме того, PDLSC обладают иммуномодулирующей способностью, сравнимой с MSC костного мозга [18]. Во-первых, PDLSC обладали низкой иммуногенностью из-за отсутствия HLA-II DR или костимулирующих молекул Т-клеток (CD80 и CD86) [26]. Во-вторых, PDLSC ингибировали пролиферацию аллогенных Т-клеток за счет активации циклооксигеназы-2 (COX-2) и простагландина E2 (PGE2) [26].Неожиданно оказалось, что после остеогенной индукции ингибирующий эффект PDLSC на пролиферацию Т-клеток остался неизменным [27]. В-третьих, PDLSC подавляли пролиферацию, дифференцировку и миграцию В-клеток посредством межклеточного контакта, который опосредован белком запрограммированной гибели клеток-1 [28]. Низкая иммуногенность и иммуносупрессивное действие на Т- и В-клетки позволяют использовать аллогенные PDLSC для регенерации пародонта. Действительно, аллогенные PDLSC были протестированы на модели овец [29] и свиней [26], и терапевтические эффекты аллогенных PDLSC были равны таковым аутологичных PDLSC.

Таким образом, PDLSC представляют собой субпопуляцию МСК, расположенных в периваскулярном пространстве, которые имеют сходство с перицитами. Однако не существует стандартного критерия для идентификации PDLSC, что приводит к несопоставимости данных исследования. Хотя использование критериев MSC [30] для идентификации PDLSC может уменьшить эти различия, они не подчеркивают специфические свойства PDLSC. Таким образом, для идентификации PDLSC необходим стандартный критерий.

3. Факторы, влияющие на свойства стволовых клеток PDLSC

Было показано, что различные факторы регулируют свойства стволовых клеток PDLSC, включая происхождение ткани, возраст донора, воспалительное состояние, метод культивирования и факторы роста.

3.1. Происхождение ткани

PDLSC были получены в основном из средней трети поверхности корня после удаления постоянного зуба. Однако Wang с коллегами [17] продемонстрировали, что часть ткани PDL осталась в альвеолярной лунке. PDLSC, выделенные из альвеолярной лунки - PDLSC, происходящие из альвеолярной кости (a-PDLSC) - сравнивались с традиционными PDLSC, происходящими из поверхности корня (r-PDLSC), и обладали более высокой пролиферативной способностью, а также более сильным остеогенным и адипогенным потенциалом дифференцировки, чем r-PDLSC .

Молочные зубы привлекают внимание в качестве источников PDLSC [21, 31, 32]. PDLSC, полученные из временных зубов (d-PDLSC), обладали большей пролиферацией, более сильным адипогенным потенциалом и остеогенным потенциалом, чем PDLSC, полученные из постоянных зубов (p-PDLSC) [31, 32]. D-PDLSCs также могут образовывать структуру цемент-PDL при имплантации голой мыши [32]. Эти наблюдения показали, что d-PDLSCs могут быть более подходящими, чем p-PDLSCs для регенерации пародонта, но результаты Song и коллег не согласуются с этим [21].В их исследованиях не было зарегистрировано значительных различий между d-PDLSC и p-PDLSC с точки зрения скорости пролиферации, экспрессии маркеров стволовых клеток или потенциала дифференцировки in vitro и . Трансплантаты P-PDLSC образовывали более типичную ткань, подобную цементу / PDL, и экспрессировали больше генов, связанных с цементом / PDL (CP23 и коллаген XII), чем трансплантаты d-PDLSC. Таким образом, неясно, какой тип PDLSC лучше всего подходит для регенерации пародонта, как и безопасность d-PDLSC.

Остаются вопросы о том, могут ли d-PDLSC вызывать абсорбцию корня, когда они контактируют с поверхностью корня постоянных зубов.Группа Джина [33] обнаружила, что PDLSC, полученные из резорбированных молочных зубов, экспрессируют повышенное содержание RUNX2, что приводит к усилению регуляции RANKL и понижению регуляции OPG как на уровне мРНК, так и на уровне белка. Этот дисбаланс между RANKL и OPG в конечном итоге привел к дифференцировке остеокластов и абсорбции корней. Таким образом, d-PDLSC из резорбированных молочных зубов могут вызывать неожиданную активацию остеокластов при использовании для регенерации пародонта, но это требует подтверждения.

Недавно были выявлены дополнительные источники PDLSC.Группа Ли [21] показала, что PDLSC, полученные из периодонтальных связок дополнительных зубов, обладают большей колониеобразующей эффективностью, чем BMMSC, и могут дифференцироваться в адипоциты и остеобласты. Более того, PDLSC, выделенные из грануляционной ткани пародонта [34, 35] у пациентов с пародонтитом, экспрессировали Stro-1 и CD146 и улучшали образование новой кости при трансплантации в дефекты свода черепа мыши. Даже в этом случае потенциальные риски PDLSC, полученные из инфицированных тканей, вызывают беспокойство, потому что влияние патогенных микроорганизмов на PDLSC в значительной степени неизвестно.Например, ЛПС из Porphyromonas gingivalis (основного возбудителя хронического пародонтита) серьезно ингибировал остеогенную дифференцировку и способствовал экспрессии провоспалительных цитокинов (IL-1 β , IL-6 и IL-8) в PDLSC человека [36] , и продолжительность таких ингибирующих эффектов еще предстоит исследовать.

Воспаление тканей пародонта не только уменьшает количество бактерий, но и разрушает поддерживающие ткани пародонта. Все больше данных свидетельствует о том, что воспаление также препятствует регенеративной способности PDLSC.PDLSC, полученные из воспаленных тканей пародонта (i-PDLSC), имели большую пролиферацию [37] и более быструю миграцию [38], но имели более низкую остеогенную способность [37] и более низкий потенциал цементогенеза по сравнению с PDLSC, полученными из здоровой ткани пародонта (h-PDLSC). Эти ингибирующие эффекты были обусловлены активацией NF- κ B [39], активацией β -катенина и активацией канонического пути Wnt [16, 37]. Кроме того, иммуномодулирующие эффекты i-PDLSC были подавлены [40].Ингибирующий эффект i-PDLSC на пролиферацию Т-клеток был значительно снижен, а индукция CD4 + CD25 + FOXP3 + регуляторных Т-клеток и секреция IL-10 также затруднялась, когда i-PDLSC совместно культивировали со стимулированными мононуклеарными клетками периферической крови.

В настоящее время удаление зуба неизбежно во время выделения PDLSC, и это препятствие для использования аутологичной трансплантации PDLSC для пациентов, которым удаление зуба не требуется. Для сравнения, МСК из десны (GMSC) легко доступны в полости рта [6], и было зарегистрировано, что они регенерируют цемент, альвеолярную кость и периодонтальную связку на модели собаки [41].GMSC, выделенные из нормальной десны и гиперпластической десны, вызванной циклоспорином-А [42], были сходными в отношении самообновления и мультипотентности. Более того, оба типа клеток индуцировали CD4 + CD25 + FOXP3 + регуляторные Т-клетки и ингибировали пролиферацию мононуклеарных клеток периферической крови, подобно PDLSC. Кроме того, команда Чена исследовала влияние воспалительных цитокинов TNF- α и IL-1 β на GMSC и PDLSC и измерила потенциал остеогенной дифференцировки [43].Они обнаружили, что остеогенная дифференцировка GMSC и PDLSC частично ингибируется воспалительной средой. Однако GMSC были более устойчивы к TNF- α и IL-1 β по сравнению с PDLSC, даже несмотря на то, что остеогенная область, образованная PDLSC, была больше, чем у GMSC в воспаленных или нормальных условиях.

Таким образом, PDLSC можно получить не только из здоровых постоянных зубов и временных зубов, но также из дополнительных зубов и воспаленной грануляционной ткани.Следует отметить, что эти одноразовые ткани пародонта могут стать в будущем важными источниками стволовых клеток. Чтобы максимизировать терапевтические эффекты PDLSC, необходимы исследования, чтобы дифференцировать биологические свойства PDLSC, полученных из разных тканей, и методы, необходимые для уменьшения воспаления.

3.2. Возраст донора

Возраст донора также влияет на стволовые клетки. PDLSC, полученные от пожилых доноров, обладали меньшей регенеративной способностью по сравнению с таковыми от молодых доноров [44]. Поэтому влияние старения на свойства стволовых клеток, особенно до аутологичного применения PDLSC у пожилых пациентов, требует внимания.Zhang и соавторы [45] сравнили биологические характеристики PDLSCs, полученных от доноров в разном возрасте, и обнаружили, что способность PDLSC к пролиферации и миграции, а также потенциал дифференцировки PDLSC уменьшаются с увеличением возраста донора. Более того, PDLSC в возрастных группах (старше 41 года) экспрессировали меньше Stro-1 и CD146, чем молодые доноры, и не могли образовывать цементно-PDL-подобные структуры in vivo , что указывает на то, что количество и регенеративная способность стволовых клеток уменьшались с увеличением донорский возраст.

Таким образом, возраст донора важен для аутологичной трансплантации PDLSC, поскольку пациенты с хроническим пародонтитом обычно старше 40 лет, когда регенеративная способность PDLSC могла быть нарушена. Лаборатория Чжэна [44] сообщила, что пролиферация и дифференциация PDLSC от старых доноров частично восстанавливались после воздействия среды, кондиционированной PDLSC молодого донора. Напротив, среда, кондиционированная PDLSC старого донора, подавляла регенеративную способность PDLSC молодого донора и ингибировала формирование структуры, подобной цементу-PDL in vivo .Растворимые факторы, особенно факторы роста и дифференцировки, в кондиционированной среде также влияют на свойства стволовых клеток; Следовательно, необходимы исследования для изучения эффектов различных растворимых факторов, секретируемых PDLSC. Наконец, необходимы методы восстановления и улучшения регенеративной способности PDLSC у пожилых пациентов.

Репликативное старение МСК неизбежно, особенно для клеточных культур. Потеря пролиферативной и регенеративной способности МСК происходит из-за потери длины теломер во время деления клеток.Согласно Baxter et al. [46], МСК in vivo уже подверглись значительной эрозии теломер со скоростью 17 пар оснований в год. Накопление укорочения теломер может в конечном итоге вызвать остановку роста и потерю мультипотентности [47], что является необратимым из-за отсутствия обратной транскриптазы теломеразы человека (hTERT) в МСК [48, 49]. Основываясь на этой теории, Fujii и его коллеги [50] установили три иммортализованных линии клеток фибробластов PDL человека с Т-антигеном обезьяньего вируса40 и трансфекцией hTERT.Эти иммортализованные клетки PDL сохраняли высокую пролиферативную активность после 120 удвоений популяции, тогда как нормальные клетки PDL прекращали пролиферировать после 10-20 удвоений популяции. Иммортализованные клеточные линии были подобны нормальным клеткам PDL с точки зрения экспрессии генов и мультипотентности, что указывает на их полезность для изучения биологических механизмов клеток периодонтальной связки человека.

Учитывая, что постнатальные стволовые клетки будут постепенно терять свои свойства стволовых клеток, плюрипотентные эмбриональные стволовые клетки с почти бесконечной продолжительностью жизни были исследованы на предмет регенерации дефектов пародонта на модели свиней [51].Свиньи GFP-экспрессирующие ЭСК, переносимые коллагеновым матриксом, были доставлены к дефектам периодонтальной фуркации, и через три месяца после трансплантации они образовали цемент и периодонтальную связку. Поскольку исследованиям ESC часто мешают этические соображения, соматические клетки могут быть преобразованы в ИПСК, которые во многих аспектах эквивалентны ESC, путем трансфекции OCT3 / 4, SOX2, KLF4 и C-MYC [52] или OCT4 , SOX2 , NANOG и LIN28 [53]. Duan и соавторы [54] сообщили, что применение ИПСК с производными эмалевого матрикса и шелковым каркасом улучшило регенерацию пародонта на модели «голых» мышей.Следует отметить, что iPSCs поддерживают эпигенетическую память о своей ткани происхождения, которая изменяет потенциал дифференцировки конкретных iPSCs [55]. Напр., ИПСК, происходящие из негематопоэтических клеток, таких как нейральные предшественники и фибробласты, обладают сниженным кроветворным потенциалом из-за остаточного метилирования в локусах, необходимых для гематопоэтической судьбы [55]. Таким образом, Wada и его коллеги [56] создали ИПСК из фибробластов десен и пародонтальных связок человека. В настоящее время неясно, лучше ли ИПСК десны или PDL, чем традиционные GMSC или PDLSC, и необходимы дополнительные исследования для оценки эффективности и безопасности этих стволовых клеток.

3.3. Способы и условия культивирования

Были внесены усовершенствования в методы и условия культивирования клеток для быстрого увеличения PDLSC без потери их стволовости. Для первичной культуры PDLSCs возможны методы как разрастания, так и ферментативной диссоциации [57]. Однако PDLSC, культивируемые методами ферментного переваривания, имели более высокую скорость пролиферации, лучшую эффективность образования колоний и большую способность к дифференцировке, чем PDLSC, вырастающие из клеток. Кроме того, успешная первичная культура была выше с коллагеназой I типа и диспазой (, 96.7%) вместе, чем с использованием трипсина и ЭДТА (, 72,7%) [58]. Следовательно, для первичной культуры PDLSC рекомендуются коллагеназа и диспаза I типа.

Питательная среда, которую часто игнорируют, также влияет на биологические свойства PDLSC. Для культивирования МСК и PDLSC широко используются две среды: минимальная основная среда Дульбекко (DMEM) и минимальная основная среда α ( α -MEM), содержащая L-глутамин и L-аскорбиновая кислота-2-фосфат. И α -MEM, и DMEM могут поддерживать фенотипы стволовых клеток (экспрессию Stro-1, CD146, CD105 и CD44) PDLSC в пассаже 8.Однако PDLSC, культивируемые в α -MEM, обладали большей скоростью пролиферации и более сильным остеогенным потенциалом, чем PDLSC, культивированные в DMEM [59]. Это может быть связано с большим количеством аминокислот, витаминов и нуклеотидов в α -MEM, чем в DMEM. Таким образом, α -MEM больше подходит для культивирования PDLSC, чем DMEM.

Клетки обычно культивируют при 20% кислорода во время размножения in vitro . Тем не менее гипоксия, по-видимому, является физиологическим микросредой для стволовых клеток [60].Экспрессия маркеров плюрипотентности (Oct-4, Sox-2 и c-Myc) и потенциал дифференцировки PDLSC были значительно увеличены после культивирования при 2% кислороде [61]. Кроме того, остеогенный потенциал PDLSCs усиливался в условиях гипоксии (2% O 2 ) через активацию сигнальных путей p38 и ERK 1/2 [62]. Таким образом, гипоксия способствует поддержанию мультипотентности PDLSC.

Первичные культуры PDLSC дали небольшое количество клеток [58] (в среднем 1250 клеток), что меньше, чем необходимо для создания клеточного листа для регенерации пародонта (по крайней мере 4 × 10 6 клеток) [19].Таким образом, PDLSCs должны размножаться по крайней мере в 12 удвоениях популяции перед применением. Следовательно, расширение PDLSCs in vitro без потери их стволовости важно. Группа Прокопа [63] предположила, что МСК, посеянные с низкой плотностью, производили больше удвоений клеток, чем те, что посеяны с высокой плотностью. Точно так же Iwata и его коллеги [58] сообщили, что PDLSCs, засеянные с низкой плотностью (50 клеток / см, 90 · 105 2 90 · 106), пролиферируют намного быстрее, чем те, которые были засеяны с относительно высокой плотностью (500 и 5000 клеток / см, 90 · 105 2 90 · 106).Эффективность колониеобразования PDLSCs, засеянных с низкой плотностью, увеличивается с пассацией (эффективность образования колоний), подразумевая, что посевные клетки с низкой плотностью могут исключительно выбирать высокопролиферативные и репликативные PDLSCs [63].

3.4. Факторы роста

Различные факторы роста были протестированы для модификации свойств стволовых клеток PDLSC, и в этом обзоре мы сконцентрируемся на последовательном использовании факторов роста.

В последнее время были предприняты попытки сохранить недифференцированные PDLSC на ранних стадиях культивирования клеток, чтобы гарантировать лучшую мультипотентность стволовых клеток для дифференцировки в остеобласты / цементобласты и фибробласты на более поздних стадиях культивирования.Согласно исследованию Liu et al. [64], ядерная экспрессия Sox-2 и Oct-4 в PDLSCs сохранялась до пассажа 3. Между тем, мРНК Sox-2 и Oct-4 в PDLSCs уменьшалась и исчезала после пассажа 3. Удивительно, но костный морфогенетический белок-4 (BMP-4) не только может усиливать пролиферацию, но также может обратить вспять снижение экспрессии Sox-2 и Oct-4 и способствовать их ядерной транслокации даже при пассаже 7. Благоприятные эффекты BMP-4 на PDLSCs может быть связано со значительным перекрытием чувствительных генов между BMP-4 и Oct-4 [65].BMP-4 может быть эффективным способом поддержания стволовости PDLSC во время длительного культивирования.

Поскольку пародонт состоит из цемента, альвеолярной кости и функциональных пародонтальных связок между ними, то использование различных факторов роста для индукции дифференцировки PDLSC в разных направлениях представляет интерес. Напр., BMP-2 и -7 и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), как было подтверждено, усиливают остеогенную дифференцировку PDLSCs и способствуют восстановлению костных дефектов на животных моделях [66–69].Напротив, трансформирующий фактор роста- β 1 (TGF- β 1) и его нижестоящий белок фактор роста соединительной ткани (CTGF) ускоряли фибробластную дифференцировку PDLSC за счет активации коллагена типа I, α -актина гладких мышц, и периостин [70–72]. Более того, фактор роста фибробластов 2 (FGF-2) способствовал пролиферации PDLSC, но обращал положительные эффекты BMP-2 и VEGF на остеогенную дифференцировку [68]. Неожиданно, последовательное использование FGF-2 с последующим BMP-2 привело к большему образованию костной ткани, чем использование только BMP-2 или FGF-2 [69].Точно так же последовательное использование FGF-2 с последующим TGF- β 1 также способствовало фибробластной дифференцировке PDLSC.

Эти данные предполагают, что стволовые клетки на разных стадиях могут нуждаться в разных типах факторов роста для поддержки их пролиферации или дифференцировки. Последовательное использование факторов роста кажется многообещающим и эффективным для улучшения регенерации стволовых клеток, но взаимодействие между различными факторами роста до конца не изучено.

4. Проблемы и советы относительно приложений PDLSC

В последнее время информация о PDLSC расширилась, но стандартный протокол для культивирования и идентификации PDLSC недоступен, и это приводит к исследованиям, которые нельзя сравнивать.Необходим консенсус относительно выделения, культивирования, идентификации и использования PDLSC. Затем мы попытались предложить такой стандарт для изоляции и идентификации PDLSCs на основе нашего обзора литературы (рис. 1 и 2).



Во-первых, молодые пациенты (моложе 30 лет) со здоровым пародонтом являются подходящими кандидатами, потому что пагубного воздействия возраста и воспаления на стволовые клетки и иммуномодуляцию PDLSC можно избежать или, по крайней мере, уменьшить.Выбор между постоянными или молочными зубами для получения PDLSC неясен. Что касается первичной культуры PDLSC, метод ферментативного расщепления с коллагеназой типа I и диспазой лучше, чем метод разрастания. Кроме того, гипоксия (2% O 2 ), α -MEM и низкая плотность посева (50 клеток / см 2 ) усиливают пролиферацию и поддерживают стволовые клетки PDLSC.

Различные факторы роста могут улучшить регенеративную способность PDLSC, а FGF-2 хорош для модуляции эффектов других факторов роста.FGF-2 и его рецепторы (FGFR1-4), которые представляют собой однопроходные трансмембранные белки с тирозинкиназной активностью [73], участвуют в самообновлении и дифференцировке эмбриональных стволовых клеток [74] и МСК [75]. На модели собак и приматов [76, 77] однократное местное применение FGF-2 в гелевом носителе успешно регенерировало цемент, альвеолярную кость и функциональные связки периодонта с волокнами Шарпея в дефектах костей с развилкой класса II. Группа Мураками [78] также обнаружила, что FGF-2 может способствовать регенерации альвеолярной кости у пациентов с пародонтитом.Однако постоянное добавление FGF-2 серьезно ингибировало активность ALP и образование кальцинированных узелков PDLC [79], указывая на то, что продолжительность действия FGF-2 является критической. Фактически, местное применение FGF-2 длилось всего одну неделю, согласно экспериментам с радиоактивным меченным FGF-2 [79]. Кроме того, Маэгава и его коллеги [69] протестировали различные стратегии последовательного использования FGF-2 и BMP-2 на BMMSC и обнаружили, что 6 дней приема добавок FGF-2 с последующими 6 днями применения BMP-2 обеспечивают максимальную минерализация.Либо укороченная, либо длительная предварительная обработка FGF-2 препятствовала синергетическим эффектам FGF-2 и BMP-2 на остеогенез.

Возможных механизмов воздействия FGF-2 на остеогенез может быть несколько. FGF-2 увеличивает скорость роста и продолжительность жизни BMMSC и поддерживает их мультипотентность за счет ингибирования клеточной дифференцировки, и этот ингибирующий эффект обратим после отмены FGF-2 [79, 80]. Местное применение FGF-2 эффективно увеличивает количество PDLSC Stro-1 + / CD146 + , не влияя на их стволовость [81], и они могут регенерировать поврежденные ткани после исчезновения FGF-2.Кроме того, FGF-2 усиливал остеогенные эффекты BMP-2 на PDLSC и MSC за счет усиления экспрессии рецептора BMP-1B [82] и стимуляции секреции VEGF [71]. Другие механизмы, которые способствуют синергетическому действию этих факторов роста, еще предстоит изучить.

В настоящее время нет специального маркера для идентификации PDLSC посредством маркировки. Таким образом, следует подчеркнуть характеристики MSC, особенно функционально связанные свойства PDLSC. Во-первых, PDLSC должны соответствовать минимальным критериям для определения MSC.Вкратце, PDLSC экспрессируют CD105, CD90 и CD73 (частота положительных результатов> 95%), но не имеют экспрессии CD45, CD34 и CD14 или CD11b, CD79a или CD19 и HLA класса II (частота положительных результатов <2%). Другие маркеры MSC, такие как Stro-1 и CD146, являются полезными индикаторами незрелых стволовых клеток, даже если они не являются PDLSC-специфичными. Сообщается, что PDLSC, положительные по Stro-1 и / или CD146, обладают большей колониеобразующей эффективностью и остеогенным потенциалом, чем отрицательные клетки [83]. Также несколько белков, связанных с функцией периодонтальных связок, могут быть потенциальными маркерами для идентификации PDLSC.Периостин, который также экспрессируется PDLSC [58, 84–87], представляет собой белок внеклеточного матрикса [88], который помогает поддерживать гомеостаз периодонтальной связки [89]. Потеря периостина из-за нокаута гена вызвала серьезное разрушение пародонтальных связок и альвеолярной кости после воздействия механических нагрузок [90]. Недавно группа Мураками [89] открыла изоформу периостина, которая преимущественно экспрессируется в периодонтальных связках, а не в других тканях и органах (коже, легком и сердце).Эта PDL-специфическая изоформа периостина активирует киназу фокальной адгезии (FAK) путем связывания с интегрином α V β 3 и, в конечном итоге, усиливает активность ALP и остеогенную дифференцировку клеток периодонтальной связки. Следовательно, периостин является функционально связанным маркером PDL, который можно использовать для идентификации PDLSC. Склераксис, белок, который необходим для дифференцировки и поддержания сухожилий и связок, также экспрессируется PDLSC [17, 87, 91]. В модели мышей с нулевым склераксисом [92] сильно пострадали передающие силу сухожилия и сердечные клапаны [93].Кроме того, повышенная регуляция склераксиса наблюдалась в МСК костного мозга крыс при механическом растяжении [94]. Сходным образом мРНК склераксиса увеличивалась, когда клетки периодонтальной связки подвергались циклической механической нагрузке [95], что указывает на то, что склераксис участвует в гомеостазе тканей при физической нагрузке. Более того, α -актин гладких мышц ( α SMA) оказался полезным маркером для идентификации стволовых клеток в пародонте [96]. α SMA-положительные клетки, находящиеся в периваскулярных областях PDL, могут дифференцироваться в фибробласты, остеобласты и цементобласты во время процесса заживления после повреждения PDL на модели мышей [97], что согласуется с распределением и регенеративной способностью PDLSC.Таким образом, эти три функционально связанных маркера PDL (периостин, склераксис и α, SMA) могут быть ценными для идентификации PDLSC.

Кроме того, потенциал мультипотентной дифференцировки PDLSC должен быть подтвержден не только in vitro (для дифференцировки в остеобласты, адипоциты и хондробласты в среде для дифференцировки), но также и in vivo (для образования структуры, подобной цементу PDL. у иммунодефицитных мышей), и последнее более убедительно. По данным Seo et al.[5], пять из тринадцати штаммов PDLSC, выделенных с помощью магнитных шариков, меченных Stro-1, не могли генерировать минерализованные или PDL-подобные ткани у мышей с ослабленным иммунитетом, что указывает на то, что экспрессия маркера MSC Stro-1 не гарантирует регенерацию пародонта. емкость in vivo . Наконец, важны иммунные характеристики PDLSC. Иммунологические свойства МСК могут изменяться при определенных условиях культивирования. Например, FGF-2 усиливал иммуносупрессивный потенциал MSC in vivo [98], тогда как воспаление подавляло иммуносупрессивную способность PDLSC [40].Таким образом, необходимо проверить иммунные свойства PDLSC, особенно тех, которые будут использоваться при аллогенной трансплантации.

PDLSC обычно получают от молодых доноров во время удаления зубов по ортодонтическим причинам, но во многих случаях удаленные зубы выбрасываются как медицинские отходы, поскольку регенерация пародонта редко требуется у молодых пациентов. К счастью, периодонтальные связки или PDLSC от этих доноров можно заморозить. После оттаивания PDLSC сохраняют свою регенеративную способность [99, 100] и иммуносупрессивную способность и успешно регенерируют ткани пародонта на модели свиней [26].Таким образом, криоконсервация может повысить удобство аллогенной трансплантации PDLSC.

Биологическая безопасность трансплантации PDLSC, особенно аллогенной трансплантации, также требует рассмотрения (рис. 3). Во-первых, PDLSC должны быть свободны от контаминации во время изоляции, культивирования и доставки. Клеточные листы и донорские клетки должны быть проверены на вирусы, включая вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) типов 1 и 2, вирус гепатита B (HBV), вирус гепатита C (HCV) и вирус Т-клеточного лейкоза человека (HTLV) типов 1 и 2. [101].PDLSC не должны быть заражены бактериями, грибами и микоплазмами в начале и в конце культивирования клеток [102]. Также могут потребоваться дополнительные тесты на случайные агенты [103], такие как неожиданные вирусы или другие вещества животного происхождения [101]. Были предприняты попытки уменьшить количество экзогенных агентов во время культивирования клеток. Например, Tarle с соавторами [104] сообщили, что PDLSC, культивированные в химически определенной бессывороточной среде (K-M), сохраняли свою мультипотентность по сравнению с PDLSC, культивированными в α -MEM с 10% FBS.Недавно группа Зини [105] исследовала другую культуральную среду, не содержащую ксено, и эта среда содержала человеческий альбумин, рекомбинантный человеческий инсулин, пастеризованный человеческий трансферрин, HEPES и L-глутамин, и она поддерживала геномную стабильность и мультипотентность PDLSC человека. Также предлагается использовать аутологичную сыворотку вместо фетальной бычьей сыворотки во время криоконсервации [106].


Трансплантация стволовых клеток также обладает канцерогенным потенциалом. Amariglio и соавторы [107] сообщили, что у пациента, перенесшего трансплантацию фетальных нервных стволовых клеток человека, была диагностирована мультифокальная опухоль головного мозга, полученная как минимум от двух доноров.Хотя не было зарегистрировано ни одного случая образования опухоли, связанного с трансплантацией МСК, этот риск необходимо учитывать перед трансплантацией PDLSC. Йошида с соавторами [108] предположили, что необходимо проводить тесты in vitro, (мягкий агар) и in vivo, (трансплантация мышам с иммунодефицитом) на канцерогенность и кариотип (окрашивание G-полосами и мультиплексную флуоресценцию in situ гибридизация). перед трансплантацией PDLSC.

Недавно сообщалось об иммунном отторжении трансплантации аутологичных недифференцированных ИПСК на мышиных моделях, и данные показывают, что дифференцировка ИПСК приводит к потере иммуногенности, ведущей к иммунной толерантности.Напротив, недифференцированные ИПСК вызывали другой иммунный ответ с высокой лимфоцитарной инфильтрацией и повышенной секрецией IFN- γ [109], указывая на то, что индукция дифференцировки in vitro может изменять иммунные свойства стволовых клеток. Несмотря на то, что PDLSC обладали неизменной иммуносупрессивной способностью до и после остеогенной индукции [18, 27], иммунные свойства PDLSC должны быть проверены еще раз перед трансплантацией, чтобы гарантировать безопасность.

Наконец, необходимо постоянное наблюдение за реципиентами, поскольку долгосрочные трансплантированные PDLSC не изучались.Группа Gronthos [110] обнаружила, что аутологичные PDLSC, меченные BrdU, выявлялись через 8 недель после трансплантации в дефекте пародонта овцы. Однако другой эксперимент, проведенный Кимом и его коллегами [111], дал другие результаты: донорские клетки от lacZ трансгенных мышей ROSA26 после окрашивания X-gal проявляли синий цвет, который отличался от клеток-хозяев, и в пародонте не было обнаружено донорских клеток. связочное пространство через две недели после аллогенной трансплантации зубов. В настоящее время судьба PDLSCs после местной трансплантации неясна, и продолжительность выживания PDLSC, а также их распределение должны быть подтверждены более надежными методами.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в отношении публикации этой статьи.

Благодарности

Мы выражаем признательность за поддержку со стороны ключевой стоматологической лаборатории провинции Гуандун и Национального фонда естественных наук Китая (грант № 81170970).

.

Смотрите также

Фотогалерея

Контакты

Клиника Эстетической Стоматологии
"Дента-Профи"
Адрес: г. Коломна, ул. Уманская д.19А, офис 27
Тел.: +7 (496) 618-57-75, +7 (916) 654-54-84
E-mail: [email protected]
Часы работы: Пн-Пт. 9 00 до 21 00
Сб. 9 00 до 19 00